近日,來(lái)自免疫化學(xué)研究所特聘教授Nicola Elvassore課題組的研究人員以"Microfluidic reprogramming to pluripotency of human somatic cells"為題,在國(guó)際著名學(xué)術(shù)期刊《NatureProtocols》上發(fā)表了最新研究成果。
人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSCs)是成體體細(xì)胞通過(guò)重編程過(guò)程衍生而來(lái)的類(lèi)胚胎干細(xì)胞,在干細(xì)胞生物學(xué)和包括精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)在內(nèi)的再生醫(yī)學(xué)中有許多潛在應(yīng)用。然而,因重編程過(guò)程效率低、成本高和工作量大等原因,人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞在臨床中的應(yīng)用遇到瓶頸。近期,來(lái)自免疫化學(xué)研究所特聘教授NicolaElvassore課題組的研究人員開(kāi)發(fā)了一種為期8天、利用每日轉(zhuǎn)染mRNA編碼的重編程因子和免疫逃避蛋白質(zhì)來(lái)提高人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞重編程效率的實(shí)驗(yàn)方案。研究人員在無(wú)異種蛋白限定條件下接種約1,500個(gè)細(xì)胞,15天后發(fā)現(xiàn)每個(gè)27平方毫米的微流體室可以獲得高達(dá)160個(gè)hiPSC的集落。
該微流體不僅有較高的重編程成功率,而且可以使數(shù)百個(gè)細(xì)胞系能夠同時(shí)進(jìn)行重編程。該實(shí)驗(yàn)方案消耗的培養(yǎng)基量也非常少,每個(gè)獨(dú)立的微流體室只消耗約300微升培養(yǎng)基。另外,hiPSC集落可以直接從微流體室提取,并且因mRNA的降解性,不必經(jīng)過(guò)進(jìn)一步集落穩(wěn)定化實(shí)驗(yàn)步驟就可用于下游應(yīng)用。研究人員還把這個(gè)實(shí)驗(yàn)方案應(yīng)用于低蛋白質(zhì)含量的培養(yǎng)基,用以研究重編程的生物分子機(jī)制。
綜上,利用該微流體系統(tǒng)形成的hiPSCs,不僅可以應(yīng)用于臨床轉(zhuǎn)化研究,對(duì)于深入研究重編程過(guò)程,也具有非常重要的意義。
免疫化學(xué)研究所副研究員CamillaLuni為文章并列第一作者,特聘教授NicolaElvassore為通訊作者,第一完成單位為上??萍即髮W(xué)免疫化學(xué)研究所。該項(xiàng)研究得到了國(guó)家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目編號(hào):31601178)的支持。
Gagliano O*, Luni C*, Qin W, Bertin E, Torchio E, Galvanin S, Urciuolo A, Elvassore N. 2019. "Microfluidic reprogramming to pluripotency of human somatic cells". Nat Prot14:722–737.
文章鏈接相關(guān)研究報(bào)道見(jiàn):https://www.nature.com/articles/s41596-018-0108-4

圖注:人成纖維細(xì)胞在微流體重編程14天后,hiPSC集落多能性標(biāo)志物的表達(dá)
